روشهای کروماتوگرافی برای تخلیص پروتئین‌ها -بخش اول
روشهای کروماتوگرافی برای تخلیص پروتئین‌ها -بخش اول
به‌منظور دستیابی به خلوص بالایی از پروتئین، چه برای مقاصد تجزیه‌ای و چه درمانی، استفاده از چندین مرحله کروماتوگرافی نیاز است. چندین روش کروماتوگرافی برای نیل به این هدف وجود دارد که از میان آنها می‌توان، روشهای تبادل یونی در pHهای مختلف، کروماتوگرافی برهم‌کنش هیدروفوبی، کروماتوگرافی اندازه طردی و کروماتوگرافی میل ترکیبی را نام برد. جداسازی با استفاده از دستگاه کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا در روشهای فاز معکوس، تبادل یونی و اندازه طردی انجام می‌شود. کروماتوگرافی فاز معکوس، پروتئین‌ها را براساس هیدروفوبیسیته نسبی آنها جداسازی می‌کند، اما به دلیل استفاده از حلال‌های آلی و احتمال از بین رفتن برخی ترکیبات، این روش به‌طور عام برای همه پروتئین‌ها قابل انجام نیست. در کروماتوگرافی تبادل یونی، جداسازی براساس بار پروتئین‌ها صورت می‌گیرد ولی در کروماتوگرافی اندازه طردی، براساس سایز خلل و فرج فاز ساکن، پروتئین‌های بزرگ‌تر از پروتئین‌های کوچک‌تر جدا می‌شوند. کروماتوگرافی میل ترکیبی، مکمل فرآیندهای تخلیص پروتئین است و در آن مواد پرکننده ستون کروماتوگرافی حاوی لیگاندی است که آن لیگاند، به‌صورت ویژه به پروتئین هدف، متصل می‌شود.
این مقاله شامل سرفصل‌های زیر است:
1- مقدمه
2- کروماتوگرافی تبادل یونی
1-2- بار پروتئین‌ها
2-2- فاز ساکن
3-2- فاز متحرک
4-2- راهبرد شویش
3- روشهای کروماتوگرافی بر پایه هیدروفوبیسیته
1-3- هیدروفوبیسیته
2-3- کروماتوگرافی برهم‌کنش هیدروفوبیک
3-3- فاز ساکن
4-3- فاز متحرک
5-3- راهبرد شویش
نتیجه‌گیری
این مقاله شامل سرفصل‌های زیر است:
1- مقدمه
2- کروماتوگرافی تبادل یونی
1-2- بار پروتئین‌ها
2-2- فاز ساکن
3-2- فاز متحرک
4-2- راهبرد شویش
3- روشهای کروماتوگرافی بر پایه هیدروفوبیسیته
1-3- هیدروفوبیسیته
2-3- کروماتوگرافی برهم‌کنش هیدروفوبیک
3-3- فاز ساکن
4-3- فاز متحرک
5-3- راهبرد شویش
نتیجه‌گیری
لطفا برای مشاهده متن کامل مقاله ابتدا وارد سایت شوید
منابـــع و مراجــــع
۱ - Glatz, C. E., Separation processes in biotechnology. Precipitation, Bioprocess Technol, 9, 329 (1990).
۲ - Sofer, G., Hagel, L., Handbook of Process Chromatography: A Guide to Optimization, Scale-upValidation, Academic Press, San Diego (1997).
۳ - Wilson, K., Walker, J, PrinciplesTechniques of Practical Biochemistry, Cambridge University Press.
۴ - Janson, J. C., Rydén, L., Protein purification, Principles, high resolution methodsapplications, Wiley-Liss, New York (1998).
۵ - Roe, S., Protein Purification Techniques, Oxford University Press, Oxford (2001).
۶ - Scopes, R., Protein Purification, PrinciplePractice, Springer-Verlag, New York (1994).
۷ - Righetti, P. G.,Caravaggio, T., Isoelectric pointsmolecular weights of proteins, J Chromatogr, 127, 1 (1976).
۸ - Karlsson, E., Ryden, L, Ion-Exchange Chromatography, in Protein Purification: Principles, High-Resolution MethodsApplications, Janson, J. C., Ryden, L, Ed., Wiley-VCH (1998).
۹ - Hahn, R., Deinhofer, K., Machold, C.,Jungbauer, A., Hydrophobic interaction chromatography of proteins. II. Binding capacity, recoverymass transfer properties, J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 790, 99 (2003).
۱۰ - Jungbauer, A., Machold, C.,Hahn, R., Hydrophobic interaction chromatography of proteins. III. Unfolding of proteins upon adsorption, J Chromatogr A, 1079, 221 (2005).
۱۱ - Machold, C., Deinhofer, K., Hahn, R.,Jungbauer, A., Hydrophobic interaction chromatography of proteins. I. Comparison of ivity, J Chromatogr A, 972, 3 (2002).
۱۲ - Mahn, A.,Asenjo, J. A., Prediction of protein retention in hydrophobic interaction chromatography, Biotechnol Adv, 23, 359 (2005).
۱۳ - Queiroz, J. A., Tomaz, C. T.,Cabral, J. M., Hydrophobic interaction chromatography of proteins, J Biotechnol, 87, 143 (2001).
