آماده‌سازی نمونه‌های زیستی به‌منظور تصویربرداری با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی- بخش اول
آماده‌سازی نمونه‌های زیستی به‌منظور تصویربرداری با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی- بخش اول
میکروسکوپ الکترونی روبشی یکی از بهترین روش‌های آنالیزی است که در حوزه‌های مختلف کاربردهای فراوانی دارد. این میکروسکوپ، امکان بررسی سطح و ریزساختار داخلی را در ابعاد میکرونی و نانومتری فراهم آورده است. امروزه یکی از حوزه‌های تخصصی و مورد توجه، نمونه‌های زیستی و بافت‌های زنده است. مشاهده این نمونه‌ها و بررسی ریز ساختارهای آنها با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی نیازمند آماده‌سازی خاصی است. به دلیل حساسیت بالای نمونه‌ها در صورتی که هر مرحله از آماده‌سازي با دقت کافی صورت نگیرد باعث ایجاد چروکیدگی، فروپاشی و یا آسیب به ساختار نمونه می‌شود و روي كيفيت تصاویر نهائي تاثير مي‌گذارد، بنابراين بسيار مهم است كه شرايط و مراحل آماده‌سازي بافت با دقت و با روش استاندارد انجام پذيرد.
روش‌های بسيار متنوعي براي آماده‌سازي انواع بافت‌های زیستی و آناليز آنها وجود دارند که با توجه به نوع بافت و ساختار آن متفاوت هستند.
در این مقاله به بررسی روش‌های کلی آماده‌سازی نمونه‌های زیستی و بافت‌های زنده شامل: (الف) تثبیت‌های مختلف (تثبیت شیمیایی و تثبیت فیزیکی)، (ب) آبگیری با درصدهای مختلف الکل و (ج) روش‌های مختلف خشک کردن (خشک کردن در هوا، خشک کن نقطه بحرانی، خشک کن انجمادی و خشک کن‌های شیمیایی) به‌منظور مشاهده ساختارهای زیستی در نزدیک‌ترین حالت به ساختار زنده آنها در SEM با قدرت تفکیک بالا پرداخته شده‌است.
این مقاله شامل سرفصل های زیر است:
1- جمع آوری نمونه
2- تثبیت
روش‌های بسيار متنوعي براي آماده‌سازي انواع بافت‌های زیستی و آناليز آنها وجود دارند که با توجه به نوع بافت و ساختار آن متفاوت هستند.
در این مقاله به بررسی روش‌های کلی آماده‌سازی نمونه‌های زیستی و بافت‌های زنده شامل: (الف) تثبیت‌های مختلف (تثبیت شیمیایی و تثبیت فیزیکی)، (ب) آبگیری با درصدهای مختلف الکل و (ج) روش‌های مختلف خشک کردن (خشک کردن در هوا، خشک کن نقطه بحرانی، خشک کن انجمادی و خشک کن‌های شیمیایی) به‌منظور مشاهده ساختارهای زیستی در نزدیک‌ترین حالت به ساختار زنده آنها در SEM با قدرت تفکیک بالا پرداخته شده‌است.
این مقاله شامل سرفصل های زیر است:
1- جمع آوری نمونه
2- تثبیت
لطفا برای مشاهده متن کامل مقاله ابتدا وارد سایت شوید
منابـــع و مراجــــع
۱ - Echlin P. Handbook of Sample Preparation for Scanning Electron MicroscopyX-Ray Microanalysis. UK: Springer; 2009.
۲ - Alberts A, Johnson J, Lewis J, Raff M, Roberts k, Walter P. Molecular Biology of the Cell. 5th ed. 2007.
۳ - Bell PB, Safiejko-Mroczka B. Preparing whole mounts of biological specimens for imaging macromolecular structures by lightelectron microscopy. Intl J Imag Sys Tech. 1997; 8(3):225-39.
۴ - Egerton RF, Li P, Malac M. Radiation damage in the TEMSEM. Micron. 2004; 35(6):399-409
۵ - Mehdizadeh Kashi A, Tahermanesh K, Chaichian SH. How to Prepare Biological SamplesLive Tissues for Scanning Electron Microscopy (SEM). GMJ.2014; 3(2):63-80
۶ - Brunk U, Bell PB, Collins VP, Forsby N.SEM of cells in culture: Osmotic effects during fxation. SEM/IITRI. 1975; 8:379-86.
